Cómo realizar diluciones en serie

Contenido

• etapas
• Método 1 Realizar una dilución simple
• Método 2 Calcular el factor de dilución final y la concentración

En química, una dilución consiste en reducir la concentración de una solución dada. Una dilución en serie es simplemente una dilución repetida de una solución original para amplificar rápidamente el factor de dilución. Este tipo de dilución a menudo se realiza durante los experimentos que requieren soluciones altamente diluidas y alta precisión, como las que involucran curvas de concentración en una escala logarítmica o aquellas que permiten calcular la densidad de bacterias en ciertos medios. Muy a menudo se realizan en bioquímica, microbiología, farmacología o química.

etapas

Método 1 Realizar una dilución simple

1. 
   

   
   Determine el líquido diluyente adecuado (o diluyente). La elección del diluyente es muy importante y depende de la solución que desea diluir. El diluyente es a menudo agua destilada, pero no es sistemática. Por lo tanto, con una solución que contiene bacterias o células, se utiliza un medio de cultivo en su lugar. Para la dilución en serie, se usa el mismo diluyente en todos los tubos.
   • Si no está seguro de qué diluyente usar, obtenga ayuda de una persona competente o busque en Internet lo que las personas tienen que hacer para una experiencia similar.

2. 
   

   
   Prepare varios tubos de ensayo que contengan 9 ml de un líquido de dilución. Estos tubos de ensayo se usarán para hacer diluciones sucesivas. El principio es simple: tomará una muestra de la solución inicial y la transferirá al siguiente tubo, luego tomará una muestra de este tubo para colocarlo en el siguiente, etc.
   • Antes de comenzar las diluciones, es aconsejable identificar de antemano los tubos de ensayo para evitar confusiones posteriores.
   • En cada tubo, tendrá una concentración diez menor que en el anterior. El primer tubo contendrá una solución diluida en la décima, segunda, centésima, tercera, milésima, y ​​así sucesivamente. Determine de antemano el número de diluciones para evitar hacer más tubos de los necesarios y desperdiciar el diluyente innecesariamente.

3. 
   

   
   
   
   Prepare un tubo de ensayo con la solución de su madre. Poner al menos 2 ml. La cantidad mínima de solución madre para la dilución en serie es de un mililitro. Permita 2 ml para una posible segunda dilución. Este tubo de solución madre, puede marcarlo como "SM".
   • Antes de comenzar una dilución en serie, mezcle bien la solución de partida.

4. 
   

   
   Haz la primera dilución. Pipetee 1 ml de la solución madre en el tubo de ensayo etiquetado "SM" y transfiera esta cantidad al tubo de ensayo etiquetado. 1/10 que ya contiene 9 ml de líquido de dilución. Mezclar para obtener una solución homogénea. En este tubo, ahora hay 10 ml de solución: 1 ml de solución madre y 9 ml de líquido de dilución. Esta nueva solución es diez veces menos concentrada que la anterior.

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   Realizar la segunda dilución. En la segunda dilución en serie, extraerá 1 ml de la solución de tubo etiquetada 1/10 y lo verterás en el tubo 1/100 que ya contiene 9 ml de líquido de dilución. El tubo 1/10 habrá sido bien mezclado antes del muestreo. Una vez realizada la transferencia, mezcle bien el tubo 1/100. La solución del tubo marcado. 1/10 es 10 veces más concentrado que el del tubo etiquetado 1/100.

6. 
   

   
   Repita esta manipulación si es necesario. Este procedimiento se puede repetir tantas veces como se desee hasta lograr la dilución deseada. Para un experimento con curvas de concentración, puede obtener una serie de soluciones con diluciones a la unidad, la décima (1/10), la centésima (1/100) o la milésima (1/1000).

Método 2 Calcular el factor de dilución final y la concentración

1. 
   

   
   Calcular el proporción La dilución final después de la dilución en serie. La relación total de dilución se obtiene multiplicando el factor de dilución por sí mismo tantas veces como haya diluciones. Matemáticamente, la fórmula es la siguiente: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_n, con D_t representando el factor de dilución total y D_n, la relación de la dilución.
   • Entonces, supongamos que realiza una dilución 1/10 de un líquido 4 veces seguidas. En la fórmula, reemplace el factor de dilución con su valor: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
   • El factor de dilución final del cuarto tubo en su dilución en serie es 1/10 000. La concentración de la solución del último tubo ahora es 10 000 veces menor que la de la solución original.

2. 
   

   
   Determine la concentración de una solución después de la dilución. Para encontrar la concentración final de una solución después de la dilución en serie, debe conocer la concentración inicial. La fórmula es entonces: C_final = C_inicial/ A, con C_final representando la concentración terminal de la solución diluida, C_inicial, la concentración de la solución madre y D, la relación de la dilución determinada de antemano.
   • Entonces, si diluye una solución celular con una concentración de 1,000,000 de células por ml y su proporción de dilución se estableció en 1,000, ¿cuál será la concentración final de su muestra diluida?
   • Usa la fórmula:
     • C_final = C_inicial/ A
     • C_final = 1 000 000/1 000
     • C_final = 1000 células / ml

3. 
   

   
   Presta atención a las unidades utilizadas. Al hacer sus cálculos, siempre verifique que esté usando las mismas unidades. Por lo tanto, si comienza a partir de una concentración de células por ml, su resultado final también estará en células por ml. Si su concentración inicial es en partes por millón (ppm), su concentración final será en partes por millón.