Cómo calibrar una pipeta

Contenido

• etapas
• Parte 1 Calibración de verificación
• Parte 2 Calcular los resultados

La pipeta es un equipo de laboratorio que se usa para medir y transferir un líquido. La precisión de medición de una pipeta es muy importante porque la más mínima diferencia de volumen puede distorsionar los resultados experimentales. Es importante calibrar las pipetas todos los meses para garantizar la precisión. Este proceso es útil para verificar si el dispositivo está entregando volúmenes específicos de líquido, y si no, puede repararlo rápidamente.

etapas

Parte 1 Calibración de verificación

1. 
   

   
   Reúna el material necesario. Para garantizar la precisión de una pipeta, necesitará una pipeta, puntas, agua destilada, un vaso de precipitados, un termómetro, un plato de pesaje y una balanza. La balanza a utilizar debe tener rangos micrométricos para calibrar la pipeta con un valor máximo de 1 μL.
   • El volumen máximo de agua a utilizar es de 5 ml. Vierte el agua en el vaso de precipitados.
   • Las puntas que se deben usar deben estar en buenas condiciones y deben ajustarse bien a su pipeta.

2. 
   

   
   Mida la temperatura del agua destilada. Inserte el termómetro en el agua destilada y déjelo durante al menos 60 segundos. Si la sustancia roja en el termómetro sigue moviéndose, espere otro minuto. Después de un minuto, tenga en cuenta la temperatura. Retire el termómetro y luego séquelo.
   • Es importante conocer la temperatura del agua porque la usará para hacer los cálculos necesarios para verificar la calibración.

3. 
   

   
   
   
   Coloque el platillo de pesaje y ponga a cero la balanza. Idealmente, su báscula debe tener una puerta y una habitación aislada. Coloque el plato de pesaje en la cámara y ciérrelo. Si su báscula no tiene una habitación o puerta, simplemente coloque la taza sobre ella. Pulse el botón cero o tara y espere a que la pantalla muestre cero.
   • Poner a cero la báscula cancela el peso del contenedor de plástico y solo pesa el contenedor.

4. 
   

   
   Prepara la pipeta. Límpielo primero con etanol y asegúrese de que el extremo no esté obstruido. Coloque la punta adecuada en el extremo de la pipeta y ajuste el volumen a analizar.
   • Pruebe el volumen más pequeño y el mayor volumen de líquido que puede extraerse de la pipeta.

5. 
   

   
   
   
   Enjuague la boquilla antes de comenzar. Presione el botón hasta la primera parada e inserte la punta en el agua destilada de aproximadamente 2 mm de profundidad. Suelte el botón para extraer el líquido, luego vuelva a dispensar el líquido presionando el botón. Repita este paso tres veces para limpiar completamente la punta de la pipeta antes de usar.
   • Presione el botón hasta la segunda parada para dispensar el líquido restante en la punta, luego retire la pipeta del agua.

6. 
   

   
   Elabora el volumen de calibración. Con la boquilla que acaba de sacar del agua, presione el botón hasta la primera parada. Inserte la punta en el agua destilada hasta una altura de 2 mm y suelte el botón para aspirar el líquido. Espere aproximadamente un segundo antes de quitarlo.
   • Asegúrese de que la boquilla esté completamente sumergida durante el proceso de succión. No debería tener burbujas en su interior, de lo contrario sus resultados serán incorrectos.

7. 
   

   
   Dispensar el líquido en el plato de pesaje. Coloque la punta contra el fondo del contenedor y presione el botón hasta la primera parada. Apunte a otro punto ligeramente alejado del primero y presione el botón hasta la segunda parada. Mientras mantiene presionado el botón, levante el extremo del plato de pesaje.
   • Mantenga la punta de la pipeta ya que la usará nuevamente para realizar más pruebas de calibración.

8. 
   

   
   Tenga en cuenta el peso indicado en la báscula. Cierre la puerta de la báscula si está usando una báscula con una cámara de pesaje. Espera hasta que los números se detengan. Para registrar el peso que se muestra en la pantalla.
   • Es importante esperar a que los números ya no se desplacen en la pantalla antes de registrar el peso. Tus cálculos serán incorrectos si no lo entiendes.

9. 
   

   
   Repita este proceso al menos 10 veces. Ponga a cero la balanza, enjuague la punta, aspire el mismo volumen, dispense el líquido y registre el peso. Registre el peso del agua destilada para el mismo volumen, luego calcule el promedio de todos los pesos que ha registrado.
   • Puede repetir este proceso con diferentes volúmenes, siempre que tenga en cuenta el peso del agua destilada para cada volumen varias veces.

Parte 2 Calcular los resultados

1. 
   

   
   Escribe la fórmula para calcular el volumen dispensado. La fórmula para calcular el volumen de líquido liberado por la pipeta es V = w x Z, siendo w el peso del agua, Z el coeficiente de conversión basado en la densidad del agua y V el volumen de agua liberada.
   • La variable Z puede obtenerse calculando la densidad del agua utilizando la temperatura registrada al comienzo del experimento.
   • Por ejemplo, si la temperatura del agua era de 23 ° C, el valor de Z es 1.003 5 μg / mg.

2. 
   

   
   Calcule el peso promedio de todas las pruebas. Supongamos que ha pesado el volumen de agua distribuido 10 veces. Para calcular el promedio de estos valores registrados, súmelos y divida la suma por 10.
   • Para un volumen de 10 μL de agua, aquí están los resultados obtenidos después de las pruebas de nuestro ejemplo: 9.89, 10.02, 10.01, 9.99, 10.04, 9.95, 9.96, 9.99 , 10.01 y 9.98.
   • El promedio es 9.984, que es (9.89 + 10.02 + 10.01 + 9.99 + 10.04 + 9.95 + 9.96 + 9.99 + 10.01 + 9.98) / 10 = 99.84 / 10.

3. 
   

   
   Reemplace las variables con su valor en la ecuación y resuélvala. Una vez que sepa el valor de las variables, insértelas en la ecuación y resuélvalas. Para encontrar el volumen de agua liberada, multiplique el peso promedio de todas las pruebas realizadas por el valor Z.
   • Volvamos al ejemplo anterior: V = w * Z = 9.984 x 1.003 5 = 10.019.

4. 
   

   
   Calcule la precisión de la pipeta. Usa la ecuación A = 100 x V_avg/ V₀ para calcular la precisión de la pipeta. A indica la precisión de la pipeta, V_avg es el promedio del volumen calculado y V₀ representa el valor establecido en la pipeta. Debe obtener entre 99 y 101% de precisión.
   • Si la pipeta está calibrada, el valor calculado debe estar cerca del valor real establecido en la pipeta.
   • Aún con nuestro ejemplo, obtenemos una precisión al 100.19 por ciento, es decir, A = 100 x V_avg/ V₀ = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.001 9.
   • Dado este resultado de precisión, podemos decir que esta pipeta está bien calibrada.

5. 
   

   
   Si es necesario, póngase en contacto con un servicio de reparación y calibración. Si la prueba de calibración no es concluyente, no use su pipeta para experimentos. La pipeta es un instrumento de laboratorio muy frágil y costoso. Si encuentra un problema de calibración que está más allá de usted, comuníquese con una empresa especializada en reparación y calibración de pipetas.
   • También puede contactar a la compañía que fabrica la marca de pipetas que utiliza para obtener un servicio de reparación.